Анализ крови на микрореакцию — что это такое? Микрореакция крови, или реакция преципитации, является наиболее достоверным методом исследования крови больного для проведения детальной и глубокой диагностики такого заболевания, как сифилис.
Проводят его для окончательного выявления специфических при данном заболевании антител. Они представляют собой уникальные белки, которые синтезирует иммунная система. Выделить такие вещества можно лишь в случае образования в организме необходимых антигенов. В свою очередь, антигены представляют собой липидные вещества, образовавшиеся из клеточных мембран, которые ранее были разрушены возбудителем любой стадии сифилиса, а именно бледной трепонемой. Это хорошая и качественная методика. Она отличается особой простотой при проведении реакций, быстротой результата и дешевизной.
Основные виды анализа
Микрореакция относится скорее к неспецифическим видам анализов, то есть не направленным на выявление самого возбудителя. Дело в том, что она способна выявить даже самые мелкие повреждения клеточных мембран, которые и будут свидетельствовать о наличии трепонемы в организме.
Существует несколько основных видов реакции микропреципитации:
- Тест с микроскопией позволяет выявить все липидные включения при помощи светового микроскопа без дополнительных веществ.
- Тест с макроскопией еще можно назвать экспресс-диагностикой развивающегося сифилиса. Основывается метод на выявлении комплекса антиген-антитело. Результат можно получить без использования специальной аппаратуры. Чтобы увидеть реакцию к полученному комплексу, просто добавляют любое химическое вещество, которое, прочно соединяясь с данным комплексом, окрашивает его.
- Тест с определенным количественным показателем. Этот тест проводится путем неоднократного разведения всего исследуемого материала, чтобы определить точное количество выявленных комплексов антиген-антитело в каждом случае.
Показания к проведению анализа
Такие исследования чаще всего проводят, чтобы выявить возбудителя сифилиса у большой группы населения. Основная цель такого анализа — это массовость, которая необходима для дальнейшей диагностики, если будет получен положительный результат.
Обычно анализ крови на микрореакцию назначается:
- в местах лишения свободы;
- при поступлении в стационар;
- беременным женщинам;
- перед оперативным вмешательством;
- военнослужащим;
- в период прохождения профилактических осмотров по месту работы;
- донорам крови.
Этот метод быстрой диагностики также широко применяют для окончательного контроля после лечения заболевания. Ведь именно реакция микропреципитации является одним из наиболее достоверных методов.
Методика проведения анализа и оценка результатов
Чтобы правильно провести такое исследование, сначала делают забор крови из пальца. Следующим анализом будет забор венозной крови из большой локтевой или другой крупной вены, который делается натощак. В случае если кровь из вены собрать невозможно, для анализа берут спинномозговую жидкость. Реакцию необходимо проводить на стерильном и обезжиренном сухом стекле. На него сразу помещается антиген, небольшая капля плазмы или сыворотка. После этого к заранее перемешанным первичным реагентам добавляют краситель. Чаще всего это могут быть небольшие кусочки угля. Обычно при проведении макроскопии всегда следят за изменением окраски препарата.
Результаты реакции могут быть следующими:
- Положительная реакция. Если в препарате будут обнаружены антитела к липидным образованиям разрушенных ранее клеточных мембран, то появится специфический осадок с наличием в нем небольших хлопьев. Такой результат может свидетельствовать о наличии в организме какой-либо из форм сифилиса, а также о частичном сохранении основного титра заболевания у небольшой группы зараженных вирусом людей уже после лечения.
- Отрицательная реакция говорит об отсутствии в крови специфических для заболевания иммунных белков. При этом никаких хлопьев в осадке обнаружено не будет. Это может означать, что сифилис не выявлен или находится уже на одной из поздних стадий. Может быть и такой вариант, когда обследование проводится на ранних этапах развития заболевания, когда антитела еще не успели образоваться или их общее количество очень мало. Такая реакция характеризуется незначительным, почти незаметным выпадением специфического осадка, что, в свою очередь, говорит о наличии малого количества антилипидных антител. В таких случаях назначают повторные анализы, советуют постоянное наблюдение у специалистов и проведение дополнительных методов обследования.
Обычно при проведении реакции микропреципитации обнаружить иммунные комплексы возможно лишь через месяц после заражения.
При развитии болезни количество антител будет только расти. Однако следует хорошо изучать все результаты проведенных исследований, поскольку на более поздних стадиях заболевания или при его скрытой форме основной титр антител может быть низким, поэтому реакция может оказаться отрицательной.
Ложные результаты анализа
Бывают случаи, когда анализ крови может показать недостоверные или ложные результаты. Такое может произойти, если была нарушена технология проведения теста. Ошибочный результат возможно получить при неправильном заборе исследуемого материала. Неправильное перемешивание ингредиентов, их загрязнение, нарушение технологии хранения — все это может привести к ошибочному результату.
Положительные ложные результаты также могут проявляться, например, при наличии в организме патологических состояний. Поэтому необходимо (до постановки окончательного диагноза) провести дополнительные исследования для выявления возможных патологий. Ложные положительные результаты могут быть при:
- беременности;
- наличии новообразований;
- сахарном диабете;
- вирусных заболеваниях печени;
- воспалении обоих легких или туберкулезе;
- при подагре;
- аутоиммунной и другой патологии любого генеза;
- алкоголизме и наркотической зависимости.
Таким образом, анализ крови на микрореакцию позволяет вовремя выявить заболевание и начать лечение.
Для установления заболеваний используются разные способы, в том числе и лабораторные методы. Микрореакция крови — это вид анализа в ходе диагностики сифилиса для выявления повреждения клеток.
Цель микрореакции крови
Исследование не является специфическим анализом, поскольку не ставит задачей найти возбудителя. Разрушение клеток может происходить и при других заболеваниях. Поэтому если результаты теста распознаются как положительные, необходимо проведение других лабораторных тестов.
Что выявляет анализ
Заболевания, передающиеся половым путём, вызываются различными возбудителями. Когда они попадают в организм, иммунитет реагирует на это повышением синтеза веществ, которые должны бороться с ними. В ответ на размножение возбудителя вырабатываются антитела, связывающие его. Сколько бактерий, столько должно быть и антител.
В ходе борьбы бледная трепонема или другой возбудитель разрушает мембрану собственных клеток. Эти остатки также требуется удалить, на что и реагирует антитело.
Анализ показывает наличие таких компонентов, их комплексов, антител и антигенов. Каждый из них можно количественно определить.
Виды исследования
Все неспецифические исследования можно разделить на две большие категории: макро- и микрореакции. Первая осуществляется без дополнительного оборудования, оценивается визуально. Вторая требует оборудования в виде микроскопа высокой степени увеличения.
Электронная микроскопия позволяет выявить разрушенные клетки без использования реактива.
Различают несколько типов анализа крови на микрореакцию:
- экспресс-тест с макроскопией;
- классическое исследование с изучением осадка;
- количественное определение.
Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.
Суть проведения анализа в том, что кровь больного помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить концентрат раствора. При наличии возбудителя происходит окрашивание жидкости.
При втором способе сыворотку крови исследуют под микроскопом, дополнительные вещества не используются. Для получения количественного значения сыворотка многократно разводится, потом направляется под микроскоп, и лаборант регистрирует количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.
Показания к проведению исследования
Ввиду простоты исследования и отсутствия необходимости использования дорогостоящих реагентов, микрореакция преципитации используется для больших групп населения, чаще всего при плановом обследовании.
Сдача анализа назначается:
- военнослужащим;
- беременным;
- больным перед операцией;
- при обследовании в тюрьме или следственном изоляторе;
- при осмотре медицинских работников, сотрудников общественного питания;
- перед сдачей крови на донорство;
- перед трансплантацией органов.
При лечении для контроля эффективности назначенной терапии исследование проводится несколько раз.
Тест на количественную реакцию показан лицам, у которых обнаружились признаки патологии, детям больных родителей, при язвах на половых органах. Также обследование нужно для подтверждения диагноза после первичных тестов или если пациент имеет другие венерические заболевания.
Подготовка
Чтобы получить достоверный результат, необходимо соблюдать правила сдачи крови. Есть несколько важных моментов, которые необходимо учитывать.
Чтобы не спровоцировать выброс излишка гормонов, обследуемый должен отказаться от значительной физической нагрузки перед забором крови, от курения, от алкоголя накануне, жирной пищи.
Сдача крови происходит натощак, поскольку липиды будут появляться пленкой сверху пробирки и могут исказить результат. Последний прием пищи должен происходит накануне около 19 часов вечера.
Забор крови для исследования
Для микрореакции необходимо взять капиллярную кровь, то есть из пальца. Она подвергается центрифугированию, то есть удаляется сгусток из форменных элементов, остается плазма. Дополнительно берут кровь из вены. Если ее невозможно взять, то подойдет спинномозговая жидкость.
Биологический материал отстаивается, плазма или сыворотка смешивается с антигеном. Одновременно с этим идет оценка протекания реакции. Медицинский работник должен следить, появляется ли изменение окраски жидкости.
Сколько годен анализ на микрореакцию крови
Венозная кровь показывает наличие следов возбудителя уже через 3-4 недели после заражения. Срок годности исследования зависит от его назначения и нормативов лечебного учреждения.
- В ходе лечения результат реакции оценивается каждые несколько недель.
- Действие анализа для медицинских работников при отрицательном результате составляет 12 месяцев.
- После контакта с потенциально больным человеком необходимо провести тест через месяц анализ независимо от того, как давно проводилось предыдущее исследование.
Расшифровка результата
Рассказывая, что это такое — микрореакция крови, необходимо также упомянуть о том, как происходит расшифровка результатов. Она может предполагать отрицательный, положительный или сомнительный итог.
Иногда определяется ложноположительный результат или ложноотрицательный. О причинах такого явления будет рассказано ниже.
Положительный результат
Такая реакция наблюдается, если на предметном стекле обнаруживаются хлопья. Значит, в сыворотке имеются антитела, которые вырабатывались к фрагментам антигена или разрушенным ими клеткам.
Результат “+” длительное время может наблюдаться даже после проведенного лечения, поскольку на очищение крови от всех фрагментов трепонем и остатков разрушенных клеток требуется немалый период. Но титр антигена будет иметь небольшое значение.
Положительная реакция может свидетельствовать о наличии у больного сифилиса, получении серорезистентности, остаточных явлениях после терапии. Бывает и ложноположительный результат.
Отрицательный результат
Отрицательная реакция наблюдается, если на предметном стекле не произошло никаких изменений, нет хлопьев. Это показывает, что нет заболевания или оно уже достигло поздней стадии.
В некоторых случаях реакция проводится слишком рано, когда еще нет антител или их фракция настолько мала, что оценить результат как положительный нет возможности. Это ложноотрицательная реакция.
Пациент успокаивается, считая, что не болен, и узнает об инфекции, когда разворачивается клиническая картина.
Ложноположительный итог
Исследование материала может выявить наличие незначительного осадка, то есть антител мало. Такой результат получается, если не соблюдать правила хранения или забора материала, использовать нестерильные материалы или нарушить правила подготовки. Достоверные результаты получаются, только если соблюдать все рекомендации перед тестированием.
Сомнительный анализ бывает и при наличии некоторых заболеваний или состояний, о которых пациент мог не знать или умолчать:
- беременность;
- опухоль;
- диабет;
- аутоиммунные процессы;
- острый воспалительный процесс легких;
- туберкулез;
- алкоголизм;
- подагра;
- наркозависимость.
Этот метод исследования при положительном результате не говорит о том, что сифилис подтвержден. Это только общий, первичный анализ, который требует уточнения. Реакция может показать наличие антител к другим возбудителям.
Для подтверждения диагноза требуется проведение трепонемных тестов — ИФА или РИА, основанных на комплексе антиген-антитело. Они позволяют определить трепонему, результат ее активности и следы жизнедеятельности.
Таким образом, анализ на микрореакцию позволяет определить наличие антител к трепонеме, но не является специфическим. Он применяется для обследования широких групп населения и позволяет выявить здоровых людей и тех, кому нужны дополнительные, более сложные анализы.
Отборочный метод исследования крови для диагностики сифилиса называют микрореакцией преципитации. Он проводится для выявления в крови антител, которые представляют собой специфические белки, синтезируемые иммунной системой. Эти вещества выделяются при образовании в организме антигенов – липидных веществ из клеточных мембран, разрушенных бледной трепонемой (возбудитель сифилиса). Методика отличается простотой в использовании, быстротой проведения и низкими финансовыми затратами.
Виды анализа
Микрореакция относится к неспецифическим (нетрепонемным) методам исследования, потому что выявляет не возбудитель, а повреждение клеток. Их разрушение может возникать при других патологиях в организме. При положительном результате анализа назначают специфические серологические тесты, такие как ИФА (иммуноферментный анализ), РПГА (реакция прямой гемагглютинации), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Они позволяют напрямую выявлять содержание возбудителя сифилиса.
Выделяют микрореакцию преципитации нескольких типов.
- Тест с макроскопией (экспресс-диагностика сифилиса). Выявление комплекса из антигенов и антител проводится без использования аппаратуры. Для визуализации невооруженным глазом в сыворотку крови добавляют химическое вещество, которое соединяется с комплексом. Применяют частички угля или красный пигмент.
- Тест с микроскопией . Для выявления липидных антител используют световой микроскоп, который позволяет не применять дополнительных веществ.
- Тест с количественным показателем . Проводится в условиях многократного разведения исследуемого материала и выявления количества комплексов в каждой порции. Титром считается последнее разведение, в котором определяется связка антиген-антитело.
Показания к проведению анализа
Исследование проводят для выявления возбудителей сифилиса среди больших групп населения. Главной целью анализа является массовость проведения скринингового теста для последующей диагностики в случае положительных результатов.
Кровь на микрореакцию назначают:
- при госпитализации в стационар;
- заключенным в местах лишения свободы;
- перед проведением оперативного вмешательства;
- беременным женщинам;
- лицам, проходящим военную службу;
- во время проведения медицинских осмотров работникам образования, медицины, общепита;
- донорам крови или органов.
Метод широко используется для проведения контроля эффективности лечения. Микрореакция преципитации относится к достоверным методам выздоровления от сифилиса. Кроме того, количественный тест помогает корректировать дозировку препаратов или проводить их замену. Стоит отметить, что специфические серологические анализы не несут в себе такую информацию и дают положительные результаты после уничтожения возбудителя в организме.
Методика проведения и оценка результатов
Для исследования делают забор капиллярной крови из пальца, венозной крови из локтевой вены натощак или получают спинномозговую жидкость. Анализ проводят на стерильном обезжиренном стекле, куда помещают классический реагент (антиген), каплю сыворотки или плазмы. После тщательного перемешивания ингредиентов и добавления частиц угля при макроскопии следят за результатами реакции.
- Положительная реакция . Характеризуется образованием хлопьев в осадке при обнаружении антител к липидам разрушенных клеточных мембран. Она свидетельствует о заболевании любой формой сифилиса, а также о сохранении титра у небольшой группы людей после лечения болезни.
- Отрицательная реакция . Характеризуется отсутствием образования характерных хлопьев, кровь не содержит специфических белков. Это означает, что сифилис не выявлен, либо находится на поздней стадии. В некоторых случаях обследование проводят на ранних этапах первичной формы болезни, когда антитела еще не образовались или их количество ничтожно мало.
- Сомнительная реакция . Выявляется незначительное выпадение осадка, что свидетельствует о низком содержании антилипидных антител. В таких случаях необходимо наблюдение, повторные анализы, назначение дополнительных методов обследования.
Возможность обнаружения иммунных комплексов при помощи микрореакции преципитации наступает через месяц после заражения. В процессе развития болезни концентрация антител нарастает. При скрытой форме и позднем сифилисе титр может быть невысоким, а иногда давать отрицательные реакции.
Ложные результаты анализа
В некоторых случаях кровь при обследовании дает ложные результаты. На это может влиять нарушение техники проведения теста. Некачественный забор исследуемого материала и его неправильное хранение, недостаточное перемешивание или загрязнение часто вызывают ошибочные реакции.
Ложноположительные результаты возникают при различных патологических и физиологических состояниях в организме. Поэтому весомое значение для верной трактовки микрореакции имеет выявление этих факторов. Ложноположительные результаты вызывают:
- вынашивание плода;
- новообразования;
- вирусные повреждения печени;
- сахарный диабет;
- воспаление легких, туберкулез;
- аутоиммунная патология;
- подагра;
- злоупотребление алкогольными напитками;
- наркотическая зависимость.
Ложноотрицательные результаты микрореакции образуются при высоком содержании иммунных комплексов в крови либо в первые недели заболевания при ничтожно малом количестве антител. В сомнительных случаях назначается консультация венеролога для осмотра кожных покровов и слизистых оболочек, проведение специфических серологических анализов.
Микрореакция преципитации крови считается эффективным скрининг-тестом для выявления сифилиса и контроля эффективности терапии. Она позволяет выявлять тяжелую патологию среди широких масс населения, назначать своевременное лечение, избегать развития запущенных форм заболевания.